在某些案例中，经过3次以上的洗消流程后，依然qPCR检测弱阳性（CT值在35-40之间），让人焦虑，抓狂。猪场管理者面对此结果，只能默认猪舍环境未洗消彻底，需要重新花费洗消成本和时间进行再次洗消，直至RT-PCR结果为阴性，才敢启动复产。
现有的病毒分离方法虽然能区分病毒的感染力，但它的培养条件要求苛刻，专业水平要求更高，仅个别专业实验室可执行，并不适用于养殖一线的快速诊断。因此，在沿用qPCR方法的基础上，能够破坏病原核酸的消毒剂成为了养猪生产者的选择。
非瘟病毒属于囊膜病毒，能被绝大多数的消毒剂杀灭，鉴于各类消毒剂对非瘟核酸破坏能力的相关研究文献数据较少，因此本文引用Andrew 等[1]发表的《Effects of disinfection on the molecular detection of porcine epidemic diarrhea virus》，该文以同属于囊膜病毒的猪流行性腹泻病毒（PEDV）为研究对象，评选出能破坏病原核酸的消毒剂，可为猪场的消毒剂选择提供参考。
<p style="margin: 0.75em 0px; padding: 0px; outline: 0px; max-width: 100%; clear: both; min-height: 1em; font-family: -apple-system, BlinkMacSystemFont, " helvetica="" neue",="" "pingfang="" sc",="" "hiragino="" sans="" gb",="" "microsoft="" yahei="" ui",="" yahei",="" arial,="" sans-serif;="" font-size:="" 17px;="" letter-spacing:="" 0.2176px;="" visibility:="" visible;="" box-sizing:="" border-box="" !important;="" overflow-wrap:="" break-word="" text-align:="" justify;"=""> Andrew 等[1]选择猪场常用的苯酚、季铵盐、季铵盐+戊二醛、过硫酸氢钾复合物（氧化剂）和次氯酸钠5种消毒剂，使用不同浓度、不同温度和不同接触时间开展体外试验、模拟现场试验和动物试验。从研究结果看，所有测试组均未分离出PEDV活病毒，即以上消毒剂均能有效杀灭PEDV，但是，苯酚、季铵盐和季铵盐+戊二醛消毒剂的qPCR检测结果均为阳性，表明这3种消毒剂不能有效破坏PEDV核酸或效果较差；而过硫酸氢钾复合物（氧化剂）和次氯酸钠均有qPCR阴性测试组，表明这2种消毒剂能不同程度地破坏PEDV核酸。详见表1、图1和图2。
a 阳性对照组样品分离出PEDV活病毒，但消毒剂测试组和阴性对照组不能分离出PEDV活病毒
图1 消毒剂作用PEDV细胞培养液的qPCR平均值，*表示结果为阴性
图2 消毒剂作用含有10%（v/v）粪浆的PEDV细胞培养液的qPCR平均值，*表示结果为阴性
从上述结果可知，为了降低qPCR对目标基因片段的检出率，可以在洗消最后一个环节，使用推荐浓度的过硫酸氢钾复合物（例如：过硫酸氢钾1:200）或高浓度的次氯酸钠进行熏蒸或喷洒消毒，确保更好的消除病原核酸，从而尽可能的避免残留核酸（死亡的病毒）对RT-PCR结果的干扰。
从上述试验结果看，次氯酸对核酸的消除能力好于各浓度的过硫酸氢钾的消除能力。
需要注意的是，Andrew 等[1]指出高浓度次氯酸钠虽然对核酸消除的效果也好（尤其是高温下），但是对人的健康有危害，吸入会造成呼吸道刺激，甚至引起肺水肿，同时会腐蚀金属设备，引起橡胶制品变质。另外，次氯酸钠的持续作用时间较短，对光敏感。因此，在使用高浓度次氯酸钠时要注意防范。另外，消毒前充分清洗猪舍内粪、尿、血等有机物，此外提高消毒温度更有利于消毒剂清除病原核酸。
在现场应用方面，可以使用氢氧化钠、过硫酸氢钾、次氯酸钠三种消毒剂轮换或结合使用，在确保消毒效果的同时，最大可能性地消除病毒的核酸，确保qPCR检测结果阴性。
参考文献：
[1] Andrew S Bowman , Jacqueline M Nolting , Sarah W Nelson，et al. Effects of disinfection on the molecular detection of porcine epidemic diarrhea virus[J]. Vet Microbiol, 2015 (3-4):213-8.
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